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实验四 精子畸形率的测定一、目的和要求 由于所需时间等原因,无需对每次采精进行精子畸形率的测定。但应当每月对每一头种公畜进行一次畸形率的测定,以绘出精子畸形率变化图。畸形率突然增高,表明存在问题,应当查找和分析原因。畸形率在25%以内,受精力一般不受影响。畸形精子一般不表现前进运动,因而随着畸形精子数增多,精子活率下降。如在检查精子运动力时,可观察到许多畸形精子,也需要进一步作形态学检查。 通过本实验,了解家畜精液中精子形态与精液品质的关系,掌握精子形态的分类和分析方法。 二、材料和仪器设备: 精液、0.5%龙胆紫酒精溶液、高倍显微镜、计数器、载玻片等。 三、方法和步骤: (一)制作抹片 1.以细玻璃棒蘸取精液1滴,滴于载玻片一端,如牛羊精液应再加1~2滴0.9%NaCl溶液。 2.以另一载玻片的顶端呈35度角,抵于精液滴上,向另一端拉去,将精液均匀涂抹于载玻片上。 3.抹片于空气中自然干燥。 (二)染色 用0.5%龙胆紫酒精溶液染色3min,水洗、晾干备用。 (三)镜检 在400倍显微镜下观察精子形态。随机观察400个精子,计算各种畸形精子所占的比例。 畸形精子百分率= (四)畸形精子形态的分类 1.头部畸形的精子 包括:窄头、头基部狭窄、梨形头、圆头、巨头、小头、头基部过宽、双头、顶部脱落等。但以前六种居多。 2.尾部畸形精子 包括:带原生质滴的精子(近端、远端)、无头的尾(它和无尾的头往往是一个精子的两部分,在分析时一般算作尾部的畸形)、单卷尾、多重卷尾、环形卷尾、双尾等。 3.中段畸形 包括:颈部肿胀、中段纤丝裸露、中段呈螺旋状、双中段等。
四、作业 绘出所观察到的各类畸形精子并计算精子畸形率。
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